Využití bioluminiscenční bakterie Escherichia coli pro stanovení aktivity komplementového systému kaprovitých ryb

Logo poskytovatele

Varování

Publikace nespadá pod Pedagogickou fakultu, ale pod Přírodovědeckou fakultu. Oficiální stránka publikace je na webu muni.cz.
Autoři

TOLAROVÁ Soňa VETEŠNÍKOVÁ ŠIMKOVÁ Andrea HYRŠL Pavel

Rok publikování 2008
Druh Konferenční abstrakty
Fakulta / Pracoviště MU

Přírodovědecká fakulta

Citace
Popis Komplementový systém je humorální faktor vrozené imunitní odpovědi ryb. Společně s fagocytózou a systémovým zánětem tvoří hlavní část nespecifické imunity. Komplementový systém je tvořen souborem více než 30 proteinů a u ryb byly popsány tři cesty jeho aktivace: klasická, alternativní a lektinová. Celková bakteriolytická aktivita (total activity TA) zahrnující všechny tři cesty a aktivita alternativní cesty (alternative pathway AP) byly stanoveny v séru a plasmě kapra obecného, Cyprinus carpio, jelce tlouště, Leuciscus cephalus a parmy obecné, Barbus barbus, všechny druhy náleží do čeledi kaprovitých ryb. Luminometrická metoda popsaná již u lososovitých ryb je založena na detekci produkce světela rekombinantním kmenem E. coli. Tato gram-negativní bakterie je citlivá k lýze způsobené komplementem, existuje tedy korelace mezi viabilitou bakterií a produkcí světla. Kontinuální měření bakteriální bioluminiscence probíhalo 3 hodiny v laboratorní teplotě. Jako měřený parametr byl použit čas potřebný pro usmrcení 50% bakterií. Bakteriolytická aktivita byla detekovatelná jak u TA, tak u AP. Spolehlivější výsledky však byly získány u TA, protože 50% pokles viability u AP nebyl vždy detekovatelný. Za účelem optimalizace metody byly testovány různé koncentrace vzorku každého druhu (TA: 0 , 350 mikrolitr/ml; AP: 0 , 400 mikrolitr/ml) a vybrané koncentrace byly použity pro následující analýzy. Vzorek plasmy parmy obecné, Barbus barbus o koncentraci 100 mikrolitr/ml potřeboval 1,48 hodin pro usmrcení 50% bakterií a vzorek jelce tlouště, Leuciscus cephalus o stejné koncentraci 1,97 hodin. K dosažení podobných hodnot u kapra obecného, Cyprinus carpio byla zapotřebí vyšší koncentrace plasmy, a to 300 mikrolitr/ml.
Související projekty:

Používáte starou verzi internetového prohlížeče. Doporučujeme aktualizovat Váš prohlížeč na nejnovější verzi.