Isolation of PCR-ready DNA from lyophilisates of <I>Trichophyton</I> fungi and from phages of <I>Staphylococcus aureus</I> using magnetic microspheres

Logo poskytovatele

Varování

Publikace nespadá pod Pedagogickou fakultu, ale pod Přírodovědeckou fakultu. Oficiální stránka publikace je na webu muni.cz.
Název česky Izolace DNA v kvalitě pro PCR z lyofilizovaných vzorků Trichophyton a z bykteriofágů Staphylococcus aureus pomocí magnetických mikročástic
Autoři

ŠPANOVÁ Alena KAHÁNKOVÁ Jana RYBNIKÁŘ Alois HORÁK Daniel PANTŮČEK Roman RITTICH Bohuslav

Rok publikování 2008
Druh Článek ve sborníku
Konference 10 th International Symposium on Hyphenated Techniques in Chromatography and Hyphenated Chromatographic Analyzers & 10 th International Symposium on Advances in Extraction Techniques 2008
Fakulta / Pracoviště MU

Přírodovědecká fakulta

Citace
www http://www.ordibo.be/htc/
Obor Genetika a molekulární biologie
Klíčová slova fungi; Trichophyton; bacteriophages; Staphylococcus aureus; nonporous magnetic hydrophilic microspheres; P(HEMA-co-EDMA)
Popis Cílem této práce byla izolace DNA v kvalitě vhodné pro PCR z lyophilizovaných buněk (spor) Trichophyton a z malých objemů fágových lyzátů fágů Staphylococcus aures. Extrakce DNA amplifikovatelné v PCR z mikroskopických hub je obtížná, protože dermatofyty obsahují polysacharidy a chitinovou buněčnou stěnu. DNA v kvalitě vhodné pro PCR izolovaná z buněčných lyzátů byla přečištěna pomocí magnetického nosiče pokrytého karboxylovými skupinami. Adsorbovaná DNA byla eluována do TE pufru a použita do PCR. Pro amplifikaci DNA Trichophyton byly využity primery ITS4 a ITS. DNA byla izolována z lyofilizátů bez kultivace buněk (spor) a současně byl eliminován i vliv inhibitorů PCR, přítomných v mediu. DNA v kvalitě vhodné pro PCR byla izolována s využitím magnetického nosiče i z bakteriofágů Staphylococcus aureus. Lyzáty bakteriofágů f77 a f53 byly podrobeny působení RNázy A a proteinázy K. Fágová DNA byla použita v PCR pro identifikaci fága.
Související projekty:

Používáte starou verzi internetového prohlížeče. Doporučujeme aktualizovat Váš prohlížeč na nejnovější verzi.