Comparison of electrophoretic methods for dextromethorphan metabolites separation obtained by in vitro incubation with microsomes

Logo poskytovatele

Varování

Publikace nespadá pod Pedagogickou fakultu, ale pod Přírodovědeckou fakultu. Oficiální stránka publikace je na webu muni.cz.
Název česky Srovnání elektroforetických method pro separaci metabolitů dextrometofanu generovaných mikrosomy in vitro inkubací
Autoři

ZEISBERGEROVÁ Marta KONEČNÝ Jiří GLATZ Zdeněk HOOGMARTENS Jos VAN SCHEPDAEL Ann

Rok publikování 2008
Druh Článek ve sborníku
Konference BOOK OF ABSTRACTS 16th International Symposium on Capillary Electroseparation Techniques
Fakulta / Pracoviště MU

Přírodovědecká fakulta

Citace
Obor Biochemie
Klíčová slova drug metabolism; microsomes; cytochrome P450; on-capillary microreaction; electrophoresis
Popis In-vitro biotransformace v přítomnosti mikrosomů prezentují systém vhodný pro studium metabolismu léčiv. Charakterizace metabolitů je vyžadována při vývoji nových léčiv. Mikrosomy, zdroj cytochromů P450, věrohodně napodobuje funkci jater, kdy jsou zachovány všechny metabolické dráhy první fáze biotransformace. Dextrometorfan (DEX), který byl vybrán jako testované léčivo, je mikrosomy přeměňován na tři metabolity. Na metabolismu DEX se podílí dvě izoformy cytochromu P450, izoforma 3A4 a 2C9. Pro sledování metabolismu DEX byly využity off-line a on-line podmínky inkubace. Metody kapilární elektrforézy(CE)nacházejí uplatnění při stanovení léčiv, metabolitů a biomarkerů. Kapilára může sloužit jako nástroj separace nebo současně může být využita jako mikronádoba pro enzymatickou reakci. Cílem této práce je srovnání CE metod separace DEX metabolitů připravených off-line a on-line způsobem. V off-line modu byla optimální separace metabolitů získána v tetraborátovém pufru (75 mM, pH 9,8) při 25C. Složení základního elektrolytu muselo být opět optimalizováno, aby byly splněny podmínky pro on-line mod, kdy inkubace i separace jsou prováděny v kapiláře současně. Nejvhodnější podmínky byly dosaženy v přítomnosti lineárního polyakrylamidu a 2-propanolu, jako aditiv základního elektrolytu. Metoda částečného plnění umožnila kombinovat odlišné pufry v rámci jedné kapiláry (přítomnost separačního a inkubačního pufru). Konečná separace byla provedena při 37C. Parametry zahrnující dávkovací schéma, promývání a další přístrojová nastavení jsou diskutována.
Související projekty:

Používáte starou verzi internetového prohlížeče. Doporučujeme aktualizovat Váš prohlížeč na nejnovější verzi.