Optimization of capillary electrophoretic method for determination of physiologically relevant nucleotides and coenzymes in cell extract
| Název česky | Optimalizace CE metody pro stanovení fyziologicky významných nukleotidů a koenzymů v buněčném extraktu |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2010 |
| Druh | Článek ve sborníku |
| Konference | CHEMICA 47S |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Biochemie |
| Klíčová slova | Nukleotid-Koenzym-Buněčný extrakt |
| Popis | Hlavním úkolem této práce bylo optimalizovat CE-metodu pro selektivní a rychlé stanovení 17 energeticky důležitých a pro metabolismus nezbytných metabolitů (purinových a pyrimidinových nukleotidů, adeninových koenzymů a Acetyl CoA). Pro zlepšení koncentrační citlivosti byla využita CZE online prekoncentrační technika-field enhanced stacking. Optimální separace byla provedena při 23 kV (pozitivní polarita)a přímé detekci při 260, 280 a 340 nm. Nejlepšího rozlišení píků bylo dosaženo s 50 mM fosfátovým pufrem, pH 5.8. Výsledná metoda dosahuje RSD v rozmezí 0.65 - 1.45 pro migrační čas a 2.37 - 5.99 pro plochu píku (n=10). Optimalizovaná metoda byla užita k analýze buněčného extraktu bakterie Paracoccus denitrificans. |
| Související projekty: |