Application of CE-C4D for beta-secretase activity assay
| Název česky | Využití CE-C4D pro stanovení enzymové aktivity beta-sekretasy |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2017 |
| Druh | Konferenční abstrakty |
| Citace | |
| Přiložené soubory | |
| Popis | Alzheimerova nemoc je nejčastější formou demence, která postihuje přes 35 miliónů lidí na celém světě. Současná léčba se soustředí na snížení symptomatických projevů, neboť kauzální léčba je doposud nedostupná. Jedním z terapeutických cílů, které by zpomalily vývoj nemoci, je inhibice enzymu ß-sekretasy, jenž je zodpovědný za tvorbu amyloid ß-peptidů. Inhibiční studie ß-sekretasy jsou prováděny zejména s využitím fluorescenční čtečky mikrotitračních destiček za použití fluorescenčně značených substrátů. Tato stanovení jsou ale zatížena systematickou chybou v důsledku možnému zhášení fluorescence testovanými inhibitory. Proto byla vyvinuta nová metoda umožňující stanovení enzymové aktivity ß-sekretasy využívající separace reakční směsi pomocí kapilární elektroforézy ve spojení s bezkontaktní vodivostní detekcí (CE-C4D). Vzorek je před separací zakoncentrován přímo v separační kapiláře pomocí přechodné isotachoforézy, čímž byly dosaženy limity detekce okolo 20 nM. Mezilehlá preciznost stanovení je 3 % a přesnost stanovení aktivity ß-sekretasy byla ověřena srovnáním s výsledky získanými pomocí hmotnostní spektrometrie. |
| Související projekty: |