Application of CE-C4D for beta-secretase activity assay

Logo poskytovatele
Název česky Využití CE-C4D pro stanovení enzymové aktivity beta-sekretasy
Autoři

MÁDR Aleš CELÁ Andrea GLATZ Zdeněk

Rok publikování 2017
Druh Konferenční abstrakty
Citace
Přiložené soubory
Popis Alzheimerova nemoc je nejčastější formou demence, která postihuje přes 35 miliónů lidí na celém světě. Současná léčba se soustředí na snížení symptomatických projevů, neboť kauzální léčba je doposud nedostupná. Jedním z terapeutických cílů, které by zpomalily vývoj nemoci, je inhibice enzymu ß-sekretasy, jenž je zodpovědný za tvorbu amyloid ß-peptidů. Inhibiční studie ß-sekretasy jsou prováděny zejména s využitím fluorescenční čtečky mikrotitračních destiček za použití fluorescenčně značených substrátů. Tato stanovení jsou ale zatížena systematickou chybou v důsledku možnému zhášení fluorescence testovanými inhibitory. Proto byla vyvinuta nová metoda umožňující stanovení enzymové aktivity ß-sekretasy využívající separace reakční směsi pomocí kapilární elektroforézy ve spojení s bezkontaktní vodivostní detekcí (CE-C4D). Vzorek je před separací zakoncentrován přímo v separační kapiláře pomocí přechodné isotachoforézy, čímž byly dosaženy limity detekce okolo 20 nM. Mezilehlá preciznost stanovení je 3 % a přesnost stanovení aktivity ß-sekretasy byla ověřena srovnáním s výsledky získanými pomocí hmotnostní spektrometrie.
Související projekty:

Používáte starou verzi internetového prohlížeče. Doporučujeme aktualizovat Váš prohlížeč na nejnovější verzi.