Stanovení vitamínu C pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s elektrochemickou detekcí
| Autoři | |
|---|---|
| Rok publikování | 2004 |
| Druh | Článek ve sborníku |
| Konference | Sborník abstrakt IV. pracovní setkání fyzikálních chemiků a elektrochemiků |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Elektrochemie |
| Klíčová slova | Ascorbic acid; HPLC-ED system; electrochemical detector; pharmaceutic samples; citrus fruits |
| Popis | Kyselina askorbová je biosyntetizována u většiny savců z glukosy. U primátů, včetně člověka, a některých dalších savců, např. morčat, některých netopýrů (kaloňů), ptáků, ryb a bezobratlých brání této syntéze nepřítomnost enzymu L-gulonolaktonoxidasy. Kyselina askorbová působí jako redukční látka, která je oxidována na kyselinu dehydroaskorbovou. Její funkce v organizmech nejsou plně objasněny, ale pravděpodobně se účastní udržování kovových kofaktorů v redukovaném stavu. Byla vypracovaná nová metoda pro stanovení kyseliny askorbová pomocí vysoko-účinné kapalinové chromatografie s elektrochemickou detekcí. HPLC-ED systém byl složen ze dvou chromatografických pump Model 582 ESA (ESA Inc., Chelmsford, MA) a chromatografické kolony Polaris C18A (150x2.0x3 mm) a osmi-kanálového CoulArray elektrochemického detektoru (Model 5600A, ESA, USA). Detektor je složen z průtočné analytické komůrky (Model 6210, ESA, USA) obsahující referenční, pomocnou (Pd) a osm porézních grafitových elektrod. V řídícím modulu je uložena chromatografické kolona, elektrochemický detektor, prostor je termostatovaný. Vzorek (5 ml) byl injektován manuálně. Kyselina askorbová byla analyzována a separována na chromatografické koloně při použití isokratické mobilní fáze obsahující 97 % 80 mM kyseliny trifluorooctové (solvent A) a 3 % acetonitrilu (solvent B). Optimální průtok mobilní fáze byl 0.4 ml/min. Elektrochemický detektor snímal odezvy při aplikovaném potenciálu na elektrody 90, 180, 270, 360, 450, 540, 630 a 720 mV. Limit detekce kyseliny askorbové se pohyboval kolem 90 nM. Vypracovanou analytickou metodu jsme využili pro stanovení kyseliny askorbové v farmaceutických přípravcích a složité biologické matrici (stanovení v citrusových plodech). |
| Související projekty: |